一种构建基因替代小鼠研究野生型和突变体非肌性肌球蛋白重链II功能的方法[CN201610823307.0] - 湖南农业大学

专利申请

2016-09-14
公布公告

2017-02-15
授权日期

2019-07-26
终止

2027-02-13

一种构建基因替代小鼠研究野生型和突变体非肌性肌球蛋白重链II功能的方法

* 专利信息仅供参考，不具有法律效力。有效专利

注册号： CN201610823307.0 申请日期： 2016-09-14 专利主类别： C12N15/85 {{ classMap["C12N15/85"] }}

申请人名称：湖南农业大学

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申请人地址：湖南省长沙市芙蓉区东湖农大路1号

专利分类项目

C12N15/85 : 用于动物细胞

A01K67/027 : 脊椎动物的新品种

专利注册信息

初审公告期号	2016-09-14	初审公告日期	2017-02-15
注册公告期号	2019-07-26	注册公告日期	2019-07-26
专用权期限	2017-02-15 - 2027-02-13	专利类型	发明公开
代理组织机构	长沙正奇专利事务所有限责任公司查看该机构代理的所有专利

专利介绍

本发明提供了一种构建基因替代小鼠研究野生型和突变体非肌性肌球蛋白重链II功能的方法。本发明改造的mpNTKV-LoxP载体更适合于构建基因打靶载体特别是基因替代目的，新加入的Pac I和Swa I都是识别八个碱基的限制性内切酶，有利于较大DNA片段的插入。构建的MYH9基因替代(即内源MYH9基因被外源编码非肌性肌球蛋白重链II基因所替代)打靶载体通过电转导入小鼠ES细胞中，经过药物筛选，ES细胞单克隆挑选，Southern Blot或PCR鉴定，发生同源重组的阳性单克隆细胞率高达90％以上，易于获得所需细胞系。使用阳性ES细胞显微注射至小鼠囊胚获得MYH9基因替代嵌合体小鼠，并且该嵌合体小鼠可以交配传代，从而获得MYH9基因替代杂合子及纯合子后代。

法律进度